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體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗
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  • 2025-04-16

一、體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗

結構畸變:在細胞分裂的中期相階段,用顯微鏡檢出的染色體結構改變,表現為缺失、斷片、互換等,可分為染色體型畸變和染色單體型畸變。

有絲分裂指數:中期相細胞數與所觀察的細胞總數之比值,是反映細胞增殖程度的指標。



二、試驗原理

在加入和不加入代謝活化系統的條件下,使培養的哺乳動物細胞暴露于受試物中。用中 期分裂相阻斷劑(如秋水仙素或秋水仙胺)處理,使細胞停止在中期分裂相,隨后收獲細胞,

制片,染色,分析染色體畸變。



三、受試物要求

固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。

液體受試物可直接加入試驗系統和/或用前稀釋至適合濃度。



四、測試方法

1.使用已建立的細胞株,如中國地鼠卵巢(CHO)細胞株或中國地鼠肺(CHL)細胞株。

2.設陽性對照物、陰性對照物和至少 3 個可供分析的受試物濃度組。

3.試驗前一天:細胞放CO2培養箱內培養。

4.試驗時:加入受試物、S9 mix、培養液處理。

5.結束后:加入含10%胎牛血清的培養液處理,于24h內收獲細胞。

6.空氣干燥或火焰干燥法制片常規制片處理,用姬姆薩染液染色。

7.對染色體畸變細胞率用X 2檢驗,以評價受試物的致突變性。

①陽性結果表明受試物引起培養的哺乳動物體細胞染色體結構畸變。

②陰性結果表明在本試驗條件下,受試物不引起培養的哺乳動物體細胞染色體結構畸變。



五、周期

檢測項目

測試周期(工作日)

體外哺乳動物細胞染色體畸變試

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